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        產品名稱:Human IL-5 elisa

        產品型號:SEKH-0012 96T

        產品報價:

        產品特點:人白細胞介素5 Human IL-5 elisa定量檢測
        索萊寶ELISA試劑盒的優勢:
        1,包被的酶標板單板可拆(能拆分成12個8孔的酶標條)
        2,提供免費代測代檢服務,代出實驗數據
        3,發文章高獎勵
        4,磁鐵可吸附式包裝盒,包裝精美耐用

        免費咨詢:010-50973127

        發郵件給我們:sales-china@solarbio.com

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        SEKH-0012 96THuman IL-5 elisa的詳細資料:

        人白細胞介素5  Human IL-5 elisa

        索萊寶ELISA試劑盒的優勢:
        1,包被的酶標板單板可拆(能拆分成12個8孔的酶標條)
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        SEKH-0261Human MSP80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0262Human Myeloperoxidase30 pg/ml62.5  -  4,000 pg/ml
        SEKH-0263Human NAP-27 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0264Human Neprilysin60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0265Human Neuroserpin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0266Human Neuropilin-2/NRP280 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0267Human NGAL/Lipocalin-215 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0268Human beta-NGF4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0269Human NGF R30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0270Human Nidogen-1/Entactin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0271Human Notch-140 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
        SEKH-0272Human NOV/CCN3 15 pg/ml31.2 - 2,000pg/ml
        SEKH-0273Human NT-315 pg/ml31.2 - 2000pg/ml
        SEKH-0274Human NT-415 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0275Human Oncostatin M 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0276Human OPG30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0277Human OSM-R80 pg/ml312  -  20,000 pg/ml
        SEKH-0278Human Osteepontin (OPN)30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0279Human Osteoactivin/GPNMB60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0281Human Osteoprotegerin/TNFRSF11B  30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0282Human PAI-1/Serpin E123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0283Human PARC/CCL184 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0284Human PBEF/Visfatin0.25 ng/ml0.5 - 32 ng/ml
        SEKH-0285Human P-Cadherin30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0286Human PD-180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0287Human PDGFRB/CD140b30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0288Human PDGFRA/CD140a15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0289Human PDGF-AA7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0290Human PDGF-BB30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0291Human  PDGF-AB7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0292Human PECAM-170 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0293Human Pentraxin 3/TSG-14110 pg/ml218 - 14,000 pg/ml
        SEKH-0294Human Periostin/OSF-230 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0295Human Perforin15pg/ml31.2 - 2,000pg/ml
        SEKH-0296Human PLGF 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0297Human PRLR4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0298Human  prolactin(PRL)7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0299Human pro-BDNF40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
        SEKH-0300Human Proprotein Convertase 9/PCSK960 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0301Human P-selectin30 pg/ml125  -  8,000 pg/ml
        SEKH-0302Human RAGE30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0303Human RBP411 pg/ml23.4 - 1,500 pg/ml
        SEKH-0304Human Relaxin-24 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0305Human RELM-beta4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0306Human Resistin8 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0308Human sCD40L7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0309Human sCD1638 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0310Human SDF-160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0311Human sE-selectin/CD62E46 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
        SEKH-0312Human SP-D80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0313Human sTNF RI/TNFRSF1A6 pg/ml12.5 - 800 pg/ml
        SEKH-0314Human sTNF RII/TNFRSF1B4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0315Human TARC/CCL174 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0316Human TGF-beta 115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0317Human TGF-beta-215 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0318Human TGF-beta 315 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0319Human Tie180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0320HumanTIM-1/KIM-1/HAVCR7 pg/ml15.6  -  1,000 pg/ml
        SEKH-0321Human Thioredoxin-1/Trx130 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0322Human Thrombospondin-1/THBS-10.8 ng/ml1.56 - 100 ng/ml
        SEKH-0323Human TIMP-115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0324Human TIMP-215 pg/ml31.2  -  2,000 pg/ml
        SEKH-0325Human TIMP-430 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0326Human TL-1A15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0327Human TRAIL/TNFSF1011 pg/ml23.4 - 1,500 pg/ml
        SEKH-0328Human TRANCE/TNFSF11/RANKL15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0329Human Transferrin/TF7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0330Human Transferrin Receptor/TFR40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
        SEKH-0331Human TREM223 pg/ml46.9 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0332Human TrkA/NTRK180 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0333Human TrkB/NTRK23pg/ml6.25 - 400 pg/ml
        SEKH-0334Human TSLP15 pg/ml31.2  -  2000 pg/ml
        SEKH-0335Human TWEAK15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0336Human UPAR 15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0337Human u-Plasminogen Activator/Urokinase30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0338Human VEGF R1/Flt-160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0339Human VEGF R2/KDR15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0340Human VEGF R3/Flt-480 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0341Human Vitamin D BP80 pg/ml156 - 10,000 pg/ml
        SEKH-0342Human Vitronectin/VTN15 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0343Human von Willebrand Factor150 pg/ml312 - 20,000 pg/ml
        SEKH-0344Human XPNPEP25 pg/ml10.9 - 700 pg/ml
        SEKH-0345Human 2B4 / CD24460 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0346Human ACBD623 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0347Human ACRV123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0348Human ADAM1523 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0349Human ALK-1 / ACVRL17 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0350Human alpha-Galactosidase A / GLA40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
        SEKH-0351Human Apolipoprotein H / APOH20 pg/ml39 - 2500 pg/ml
        SEKH-0352Human ASGPR1 / ASGR120 pg/ml39 - 2500 pg/ml
        SEKH-0353Human B4GALT1 / GGTB278 pg/ml156 - 1,0000 pg/ml
        SEKH-0354Human BAMBI / NMA9 pg/ml18.7 - 1200 pg/ml
        SEKH-0355Human CD112 / Nectin-2 / PVRL27 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0356Human  EMMPRIN/CD147 3 pg/ml6.25 - 400 pg/ml
        SEKH-0357Human SLAMF1 / SLAM / CD1504 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0358Human CD157 / BST123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0359Human CD160 /BY5546 pg/ml93 - 6,000 pg/ml
        SEKH-0360Human CD171 / N-CAML1 / L1CAM23 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0361Human CD8A / MAL40 pg/ml78.1 - 5,000 pg/ml
        SEKH-0362Human Cystatin 7 / CST7117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
        SEKH-0363Human Cystatin E / CST64 pg/ml7.81 - 500 pg/ml
        SEKH-0364Human Cystatin S / CST44 pg/ml7.81 - 500 pg/ml
        SEKH-0365Human Cystatin SA / CST22 pg/ml4.7 - 300 pg/ml
        SEKH-0366Human Cystatin SN / CST130 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0367Human ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG60 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0368Human JAML / AMICA117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
        SEKH-0369Human Junctional Adhesion Molecule A / JAM-A7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0370Human KIT / c-KIT / CD11711 pg/ml23.4 - 1500 pg/ml
        SEKH-0371Human KLK11 / Kallikrein-1123 pg/ml46.8 - 3,000 pg/ml
        SEKH-0372Human KLK13 / Kallikrein 1320 pg/ml39 - 2500 pg/ml
        SEKH-0373Human KLK3 / Kallikrein 330 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0374Human LGALS32 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
        SEKH-0375Human LOXL278 pg/ml156 - 1,0000 pg/ml
        SEKH-0376Human P4HB46 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
        SEKH-0377Human PDK / PDZ binding kinase / TOPK30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0378Human PHPT17 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0379Human PIGR30 pg/ml62.5 - 4,000 pg/ml
        SEKH-0380Human PNLIP7 pg/ml15.6 - 1,000 pg/ml
        SEKH-0381Human PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone312 pg/ml625 - 4,0000 pg/ml
        SEKH-0382Human PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-1412 pg/ml24 - 1500 pg/ml
        SEKH-0383Human REG1B2 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
        SEKH-0384Human REG42 pg/ml3.9 - 250 pg/ml
        SEKH-0385Human RNase A / Ribonuclease A / RNASE160 pg/ml125 - 8,000 pg/ml
        SEKH-0386Human SAA4 20 pg/ml39.06 - 2500 pg/ml
        SEKH-0387Human SCGN / Secretagogin 4 pg/ml7.8 - 500 pg/ml
        SEKH-0388Human SIGLEC5117 pg/ml234 - 15,000 pg/ml
        SEKH-0389Human STK4 / MST146 pg/ml93.8 - 6,000 pg/ml
        SEKH-0390Human SULT1E115 pg/ml31.2 - 2,000 pg/ml
        SEKH-0391Human Tetranectin / CLEC3B55 pg/ml109 - 7,000 pg/ml
        SEKH-0392Human TFPI23 pg/ml

        46.8 - 3,000 pg/ml

         

        人白細胞介素5  人白細胞介素5 

        人白細胞介素5ELISA 試劑盒
        產品編號:SEKH-0012
        適用于人血清、血漿或細胞培養上清液等樣本

        Human IL-5 elisa

         


         

         

         

        背景介紹:
              人IL-5由抗原活化的 CD4+T 細胞產生,在小鼠則由Th2亞群細胞產生。天然IL-5的分子量為40~50KD, 是由二硫鍵連接的二聚體糖蛋白,但是單體 IL-5 也有 IL-5 活性。人的 IL-5 由 134 氨基酸殘基組成,含 22 氨基酸殘基信號肽,2 個糖基化點,人和小鼠 IL-5 基因分別定位于第 5 號和第 11 號染色體,人和鼠 IL-5 在 氨基酸水平上有 70%的同源性,人和鼠 IL-5Rα鏈有 79%的同源性。IL-5 主要有促進 B 細胞分化與生長;誘 導嗜酸性粒細胞分化;促進 IgA 合成;誘導細胞毒 T 細胞(CTL)的生成以及刺激嗜酸性粒細胞增殖、分化及活 化等作用。

         

        檢測原理:
             Solarbio  ELISA 試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯免疫吸附檢測技術。將抗人 IL-5 單克 隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本,標準品和樣本中的人 IL-5 會與酶標 板上的包被抗體充分結合;洗板后加入生物素化抗人 IL-5 抗體,該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標準品 和樣本中的人 IL-5 發生特異性結合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,生物素與鏈 霉親和素會發生高強度的非共價結合;洗板后加入顯色劑底物 TMB,若反應孔中樣品存在不同濃度的人 IL-5, 則 HRP 會使無色 TMB 變成不同深淺(正相關)的藍色物質,加入終止液后反應孔會變成黃色;后,在 λmax=450 nm(OD=450 nm)處測定反應孔樣品吸光度(OD),樣本中的人 IL-5 濃度與 OD 成正比,通過 繪制標準曲線和四參數擬合軟件便可計算出樣本中人 IL-5 的濃度。

         

        原理圖:

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        注意事項:
        1. 試劑盒應在有效期內使用,請不要使用過期的試劑。
        2. 試劑盒未使用時應保存在 2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
        3. 試劑盒使用前請在室溫恢復 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
        4. 在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持*。
        5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜(※)及潔凈塑料容器。

        6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
        7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
        8. 為保證結果準確,每次檢測均需做標準曲線。

         

        安全提示:
        試劑盒中的終止液為酸性溶液,操作人員在使用時請帶上手套并注意防護;在操作過程中也要避免試
        劑接觸皮膚和眼睛,如果不慎接觸,請用大量清水清洗;檢測血液樣本及其它體液樣本時,請按國家生物
        實驗室安全防護有關管理規定執行。

         

         

        自備實驗器材(不提供,可代購)
        1. 酶標儀(主波長 450nm,參考波長 630nm)
        2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
        3. 洗板機或洗瓶
        4. 37℃孵育箱
        5. 雙蒸水,去離子水,量筒等
        6. 稀釋用聚丙烯試管

         


        樣本收集及儲存:
        1. 細胞培養上清:
        將細胞培養基移無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管于-20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
        2. 血清樣本:
        室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于
        -20℃下保存(24 小時內檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
        3. 血漿樣本:
        將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min ,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
        ※注意:血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高
        于標準品的值,請將樣品做適當倍數稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數。

         

         

        試劑準備:
        1. 試劑回溫:先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下,濃縮洗滌液如出現結晶,請放入
        37℃溫浴直到結晶全部溶解。
        2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用雙蒸水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋成 1 倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。
        3. 標準品梯度稀釋:加入標準品/樣本稀釋液(SR1)1ml凍干標準品中,靜置15分鐘待其*溶解后輕 輕混勻(濃度為2000pg/ml),然后在其余七管中各加入500?1?78?1?76L標準品/樣本稀釋液(SR1),按照以下濃度 進行2倍稀釋:300(標準品稀釋液700ul+溶解好的標準品原液300ul)、150、75、37.5、18.75、9.375、 4.68、0 pg/ml進行稀釋。300pg/ml為標準曲線點濃度,標準品/樣本稀釋液(SR1)作為標準曲線的 零點(0pg/ml)。復溶過的標準品原液(2000pg/ml)未用完的應廢棄或根據需要按照一次用量分裝,并 將其貯存在-20~-80℃冰箱,具體如下圖。

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        4. 生物素化抗體工作液:預先計算好試驗所需用量,用檢測稀釋液(SR2)將100倍抗體濃縮液稀釋成1倍

        應用工作液(稀釋前充分混勻),請在30分鐘內加入到反應孔中。


        5. 酶結合物工作液:按每次試驗所需用量配制,用酶結合物稀釋液(SR3)將100倍濃縮酶結合物稀釋成1 倍應用工作液(稀釋前離心),請在30分鐘內使用。


        6. 洗滌方法: 

        自動洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,注入洗滌液為 300ul/孔,注 與吸出間隔為 30 秒,洗板 5 次。 

        手工洗板:甩盡酶標板孔中液體,在厚迭吸水紙上拍干,用洗瓶加入洗滌液 300ul/孔,靜止 30 秒后甩 凈酶標板孔中液體,在厚迭的吸水紙上拍干,洗板 5 次。

         

        結果判斷:

        1.用酶標儀 450 nm 波長測定 OD 值。選擇雙波長檢測,參考波長為 630 nm。如不能進行雙波長檢測,請 用 450 nm 的 OD 測定值減去 630 nm 的 OD 測定值。

        2.計算標準品、樣品的平均 OD 值:每個標準品和標本的 OD 值應減去零孔的 OD 值

        3.以標準品濃度為橫坐標,吸光度OD值為縱坐標,用軟件繪制標準曲線,樣品中IL-5含量可通過對應OD 值由標準曲線換算出相應的濃度。

        4.若標本 OD 值高于標準曲線上限,應做適當稀釋后重新檢測,計算濃度時再乘以稀釋倍數。

         



         

        1. 數據及標準曲線

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        本圖僅供參考,應以當次試驗標準品繪制的標準曲線計算人 IL-5 的樣本含量

         

        2. 靈敏度:
        低可檢測人 IL-5 濃度達 2pg/ml,
        20 個零標準品濃度 OD 的平均值加上兩個標準差,計算相應的可檢測濃度。


        3. 特異性:
        不與人 IL-3、IL-5 Rα、IL-5 Rβ反應,小鼠 IL-5 等反應。


        4. 重復性:
        板內,板間變異系數<10%。


        5. 回收率:
        在選取的健康人血漿、細胞培養上清中加入 3 個不同濃度水平的人 IL-5,計算回收率。

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        6. 線性稀釋:

        分別在選取的 4 份健康人血漿和細胞培養上清中加入高濃度人 IL-5,在標準曲線動力學范圍內進行稀 釋,評估線性。





         

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